大腸菌群、大腸桿菌檢測時(shí)，所用培養(yǎng)基LST、BGLB、EC肉湯等這些需要用小倒管（杜氏管）考察產(chǎn)氣的培養(yǎng)基，滅菌后，偶爾會(huì)有小氣泡留在小倒管內(nèi)，導(dǎo)致培養(yǎng)基不能使用。重復(fù)滅菌不僅費(fèi)時(shí)，更重要的是會(huì)破壞培養(yǎng)基的有效成分。為了避免這類問題的發(fā)生，我公司實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，做出以下幾種可能原因分析：
原因一：高溫高壓滅菌鍋工作壓力不夠，使氣體不能完全排出
高壓鍋在滅菌過程中產(chǎn)生的最大壓力不夠，不能將小倒管內(nèi)的氣體擠出，導(dǎo)致滅菌后任留有小氣泡。此外，高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達(dá)不到滅菌溫度，也會(huì)出現(xiàn)類似現(xiàn)象。
解決辦法：使用檢查滅菌效果的用品－壓力蒸汽滅菌指示卡，對高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進(jìn)行監(jiān)測。
原因二：試管塞塞得太緊
在滅菌時(shí)，試管塞塞得太緊（有些硅膠塞與試管不配套）會(huì)導(dǎo)致試管內(nèi)壓力與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。當(dāng)滅菌鍋升溫升壓時(shí)，鍋內(nèi)壓力會(huì)大于試管內(nèi)壓力，試管內(nèi)壓力不夠，不能將小倒管內(nèi)氣體排盡，就留有氣泡；當(dāng)滅菌鍋降溫降壓時(shí)，鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力，可能會(huì)使試管塞和培養(yǎng)基崩出，培養(yǎng)基報(bào)廢。
解決辦法：改用塑料帽、不銹鋼管帽，或者與試管相匹配的硅膠塞。
原因三：小倒管口太小
小倒管在加熱加壓后，一方面液體培養(yǎng)基要進(jìn)入小倒管，另一方面小倒管內(nèi)部的空氣要被排出，如果小倒管管口太小，液體不容易進(jìn)去，里面的空氣不容易被排出，就會(huì)導(dǎo)致有小氣泡生成。解決辦法：改用開口比較大的倒管。 以上提供幾種可能形成氣泡的主要原因，還有幾點(diǎn)建議：
1.可以在高壓鍋壓力降下來后，溫度不太高的時(shí)候?qū)⑴囵B(yǎng)基從鍋中拿出，迅速放在冷水中，急冷，注意要使冷水高度超過試管中液面高度。利用熱脹冷縮的原理，可以使小倒管中氣泡排出。
2.若使用非全自動(dòng)高溫高壓滅菌鍋（此類鍋一般需要在100℃手動(dòng)關(guān)閉放氣閥），則不要在鍋剛達(dá)到100℃時(shí)就關(guān)閉放氣閥，可以讓高壓鍋在100℃時(shí)多排一會(huì)兒熱氣，這樣有助于小倒管中氣體排出。
此外，盡量不要采用將滅菌后的試管顛倒或大角度傾斜的方式，使小倒管內(nèi)氣體排出。此種方法可能會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基通過試管口或試管塞受到污染，或者導(dǎo)致試管內(nèi)液體流出。
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